Konserwatywna kaskada fosfatazy, która reguluje biogenezę błony jądrowej

    • Nowo powstająca rodzina fosfataz, które są członkami nadrodziny dehalogenaz halokwasów, zawiera katalityczny motyw DXDX(T/V). Niedawno wykazano, że członek tej rodziny fosfataz DXDX(T/V), znany jako Dullard, jest potencjalnym regulatorem rozwoju cewy nerwowej  u Xenopus [Satow R, Chan  TC , Asashima M (2002) Biochem Biophys Res Commun 295:85-91 ].
    • Tutaj pokazujemy, że ludzki Dullard i białko drożdżowe Nem1p pełnią podobne funkcje odpowiednio w komórkach ssaków i komórkach drożdży. Oprócz podobieństwa w sekwencji pierwszorzędowej, Dullard i Nem1p posiadają podobne domeny i wykazują podobne preferencje co do substratów i oba lokalizują się w otoczce jądrowej.
    • Dodatkowo pokazujemy, że ludzki Dullard może uratować nieprawidłową morfologię otoczki jądrowej komórek drożdży nem1Delta, funkcjonalnie zastępując Nem1p.
    • Wreszcie, wykazano, że Nem1p deposforyluje drożdżową fosfatazę kwasu fosfatydowego Smp2p [Santos-Rosa H, Leung J, Grimsey N, Peak-Chew S, Siniossoglou S (2005) EMBO J 24: 1931-1941] i pokazujemy, że Dullard defosforyluje ssaczą fosfatazę kwasu fosfatydowego, lipinę.
    • Dlatego proponujemy, że Dullard uczestniczy w unikalnej kaskadzie fosfatazy regulującej biogenezę błony jądrowej i że ta kaskada jest zachowana od drożdży do ssaków.

    Egzosomy pochodzące z mezenchymalnych komórek macierzystych poprawiają mikrośrodowisko zawału mięśnia sercowego, przyczyniając się do angiogenezy i przeciwdziałania stanom zapalnym.

    1. Mezenchymalne komórki macierzyste szpiku kostnego (MSC) szeroko stosowane w leczeniu zawału mięśnia sercowego stają w obliczu wyzwań związanych z przeżyciem w mikrośrodowisku zapalnym i niedokrwiennym ostrego zawału mięśnia sercowego. W badaniu postawiono hipotezę, że egzosomy pochodzące z MSC odgrywają istotną rolę w poprawie mikrośrodowiska po ostrym zawale mięśnia sercowego i miały na celu zbadanie parakrynnego wpływu egzosomów na angiogenezę i aktywność przeciwzapalną.
    2. MSC hodowano w DMEM/F12 uzupełnionym 10% płodową surowicą bydlęcą pozbawioną egzosomów i 1% penicyliną-streptomycyną przez 48 godzin. Egzosomy pochodzące z MSC izolowano przy użyciu ExoQuick- TC .  Przeprowadzono testy tworzenia rurek  i proliferacji komórek T, aby ocenić siłę angiogenną egzosomów pochodzących z MSC. Ostry zawał mięśnia sercowego wywołano u szczurów Sprague-Dawley, a do mięśnia sercowego graniczącego ze strefą zawału wstrzyknięto w cztery różne miejsca sól fizjologiczną buforowaną fosforanem (PBS, kontrola), egzosomy pochodzące z MSC i ubogą w egzosom pożywkę hodowlaną MSC.
    3. Egzosomy pochodzące z MSC znacznie zwiększyły tworzenie się rurek ludzkich komórek śródbłonka żyły pępowinowej, upośledziły funkcję komórek T poprzez hamowanie proliferacji komórek in vitro, zmniejszyły rozmiar zawału i zachowały czynność skurczową i rozkurczową serca w porównaniu z PBS, znacznie zwiększając gęstość nowych funkcjonalnych naczyń włosowatych a zatem odzyskiwanie przepływu krwi w szczurzym modelu zawału mięśnia sercowego.
    4. Egzosomy stymulują neowaskularyzację i hamują odpowiedź zapalną, poprawiając w ten sposób czynność serca po uszkodzeniu niedokrwiennym.

    Egzosomy pochodzące z mezenchymalnych komórek macierzystych poprawiają mikrośrodowisko zawału mięśnia sercowego, przyczyniając się do angiogenezy i przeciwdziałania stanom zapalnym.

    • Mezenchymalne komórki macierzyste szpiku kostnego (MSC) szeroko stosowane w leczeniu zawału mięśnia sercowego stają w obliczu wyzwań związanych z przeżyciem w mikrośrodowisku zapalnym i niedokrwiennym ostrego zawału mięśnia sercowego. W badaniu postawiono hipotezę, że egzosomy pochodzące z MSC odgrywają istotną rolę w poprawie mikrośrodowiska po ostrym zawale mięśnia sercowego i miały na celu zbadanie parakrynnego wpływu egzosomów na angiogenezę i aktywność przeciwzapalną.
    • MSC hodowano w DMEM/F12 uzupełnionym 10% płodową surowicą bydlęcą pozbawioną egzosomów i 1% penicyliną-streptomycyną przez 48 godzin. Egzosomy pochodzące z MSC izolowano przy użyciu ExoQuick- TC .  Przeprowadzono testy tworzenia rurek i proliferacji komórek T, aby ocenić siłę angiogenną egzosomów pochodzących z MSC. Ostry zawał mięśnia sercowego wywołano u szczurów Sprague-Dawley, a do mięśnia sercowego graniczącego ze strefą zawału wstrzyknięto w cztery różne miejsca sól fizjologiczną buforowaną fosforanem (PBS, kontrola), egzosomy pochodzące z MSC i ubogą w egzosom pożywkę hodowlaną MSC.
    • Egzosomy pochodzące z MSC znacznie zwiększyły tworzenie się rurek ludzkich komórek śródbłonka żyły pępowinowej, upośledziły funkcję komórek T poprzez hamowanie proliferacji komórek in vitro, zmniejszyły rozmiar zawału i zachowały czynność skurczową i rozkurczową serca w porównaniu z PBS, znacznie zwiększając gęstość nowych funkcjonalnych naczyń włosowatych a zatem odzyskiwanie przepływu krwi w szczurzym modelu zawału mięśnia sercowego.
    • Egzosomy stymulują neowaskularyzację i hamują odpowiedź zapalną, poprawiając w ten sposób czynność serca po uszkodzeniu niedokrwiennym.

    Przydatność hybrydowego SPECT/CT w scyntygrafii leukocytów znakowanych 99mTc-HMPAO w zakażeniach kości i stawów.

    • Skanowanie białych krwinek za pomocą (99m) Tc -heksametylopropylenoaminooksymu (HMPAO) okazało się bardzo czułe i specyficzne w diagnostyce i obserwacji pacjentów z podejrzeniem zapalenia kości i szpiku. Celem tego prospektywnego badania była ocena przydatności SPECT i transmisyjnej CT wykonywanych jednocześnie z użyciem hybrydowego urządzenia do obrazowania funkcjonalnego anatomicznego infekcji kości i stawów.
    • (99m) Tc -HMPAO scyntygrafię wykonano u 28 kolejnych pacjentów: 15 z podejrzeniem infekcji kości (grupa 1) i 13 z podejrzeniem infekcji implantu ortopedycznego (grupa 2). Skany planarne uzyskano 30 min, 4 godz. i 24 godz. po wstrzyknięciu. SPECT/CT uzyskano 6 godzin po wstrzyknięciu znacznika, stosując dwugłowicową kamerę gamma sprzężoną z lampą rentgenowską małej mocy. U wszystkich pacjentów wyniki scyntygraficzne porównywano z wynikami operacji lub posiewów oraz obserwacji klinicznej.
    • (99m) Scyntygrafia Tc -HMPAO była prawdziwie dodatnia dla zakażenia u 18 z 28 pacjentów (w sumie 21 miejsc wychwytu) i prawdziwie ujemna u 10 z 28 pacjentów. Badanie SPECT/CT zapewniło dokładną anatomiczną lokalizację wszystkich dodatnich ognisk. W odniesieniu do ostatecznej diagnozy SPECT/CT wniósł istotny wkład kliniczny u 10 z 28 pacjentów (35,7%). W rzeczywistości badanie SPECT/CT różnicowało zajęcie tkanek miękkich od kości zarówno u pacjentów z zapaleniem kości i szpiku, jak i u pacjentów z implantami ortopedycznymi, umożliwiło prawidłowe rozpoznanie zapalenia kości i szpiku u pacjentów ze zmianami strukturalnymi po urazie oraz zidentyfikowało zakażenie błony maziowej bez zajęcia protezy u pacjentów z kolanem wszczepiać.
    • Nasze wyniki wskazują, że SPECT/CT wykonane przy użyciu urządzenia hybrydowego mogą poprawić obrazowanie z użyciem leukocytów znakowanych (99m) Tc -HMPAO u pacjentów z podejrzeniem zapalenia kości i szpiku, zapewniając dokładną lokalizację anatomiczną i precyzyjne określenie zakresu infekcji.

    Tło genetyczne ma duży wpływ na penetrację i nasilenie defektów twarzoczaszki u myszy heterozygotycznych pod względem genu kodującego białko jąderkowe Treacle.

    Zespół Treachera Collinsa ( TCS ) jest zaburzeniem twarzoczaszki, które wynika z mutacji w TCOF1, który koduje białko jąderkowe Treacle. Nasilenie objawów klinicznych jest bardzo zróżnicowane i obejmuje hipoplazję żuchwy i szczęki, nieprawidłowości w obrębie uszu zewnętrznych i kosteczek ucha środkowego oraz rozszczep podniebienia. Aby określić funkcję in vivo Treacle, wcześniej wytworzyliśmy heterozygotyczne myszy Tcof1 na mieszanym tle C57BL/6 i 129.
    Te myszy wykazywały śmiertelny fenotyp, który obejmował nieprawidłowy rozwój szczęki, brak oczu i przewodów nosowych oraz  wady cewy  nerwowej. Tutaj pokazujemy, że umieszczenie mutacji na różnych podłożach genetycznych ma duży wpływ na penetrację i nasilenie defektów twarzoczaszki i innych. Potomstwo wykazuje znacznie zmienne fenotypy zależne od szczepu, które wahają się od skrajnie ciężkich i śmiertelnych na tle mieszanym CBA/Ca i 129, do pozornie normalnych i żywotnych na tle mieszanym BALB/ci 129.

    50ml TC Tubes, Conical, 440 units/box

    04-5540150 Gentaur Genprice 440 units/box 71 EUR

    50ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, UNASSEMBLED

    SCT-50ML-500 CORNING 50/pk 87 EUR

    50ml Conical Centrifuge Tubes, Green Cap, 25/Bag

    CT788-G Bio Basic 1PK, 25UNIT 56.09 EUR

    50ml Conical Centrifuge Tubes, Yellow Cap, 25/Bag

    CT788-Y Bio Basic 1PK, 25UNIT 56.09 EUR

    50ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, ASSEMBLED, PRE-STERILIZED

    SCT-50ML-25-S CORNING 25/pk 98 EUR

    ExoQuick TC 50ml

    EXOTC50A-1 SBI 50 ml 1222 EUR

    50ml Conical Centrifuge Tubes, Green Cap, Sterile, 25unit (cardboard rack)

    CT788-GS Bio Basic 1PK, 25UNIT 61.35 EUR

    50ml Conical Centrifuge Tubes, Yellow Cap, Sterile, 25unit (cardboard rack)

    CT788-YS Bio Basic 1PK, 25UNIT 61.35 EUR

    50ML , CONICAL BOTTOMED TUBE WITH CAP, RACKED, ASSEMBLED, PRE-STERILIZED

    SCT-50ML-R-S CORNING 250/pk 106 EUR

    TC-TUBES GLASS

    99447-16 CORNING 250/pk 373 EUR

    Assay Buffer, 50ML

    X100-50ML Arbor Assays 50ML 109 EUR

    Assay Buffer, 50ML

    X117-50ML Arbor Assays 50ML 143 EUR

    Extraction Solution, 50ML

    X123-50ML Arbor Assays 50ML 123 EUR

    Purified Water, 50ML

    X137-50ML Arbor Assays 50ML 122 EUR

    Hemoglobin Sample Diluent, 50ML

    X052-50ML Arbor Assays 50ML 153 EUR

    PCS-440-030 Medium

    PCS-440 Addexbio RT 500 mL Bottle 151 EUR

    COOLRACK 50ML, HOLDS 4 X 50ML CONICAL CENTRIFUGE TUBE

    432062 CORNING 1/pk 308 EUR

    DetectX® Creatinine Reagent, 50ML

    C004-50ML Arbor Assays 50ML 359 EUR

    Block, 24 x1.5ml centrifuge tubes (conical)

    BCM1412-BSW1500 Bio Basic 1 pcs, 1 UNIT 194.34 EUR

    RACK HOLDER FOR 50ML TEST TUBES

    480169 CORNING 1/pk 69 EUR

    Block, 2 x 50ml centrifuge tubes

    BCM1405-B500 Bio Basic 1 pcs, 1 UNIT 189.41 EUR

    Block, 5 x 50ml centrifuge tubes

    BCM1412-BSW50 Bio Basic 1 pcs, 1 UNIT 194.34 EUR

    SINGLE BLOCK, 5 X 50ML CENTRIFUGE TUBES

    480129 CORNING 1/pk 114 EUR

    SingleStep Poly-HRP Anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP-50ml

    Q2AB1-50ml EnQuireBio 50ml 403 EUR

    SingleStep Poly-HRP Anti-Rabbit IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP-50ml

    Q2AB2-50ml EnQuireBio 50ml 403 EUR

    FALCON®POLYSTYRENE PLUG SEAL SCREW CAPS FOR 50ML CONICAL BOTTOM CENTRIFUGE TUBES, STERILE, 50/PACK, 1000/CASE

    358206 CORNING 50/pk 121 EUR

    0.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS. CLEAR

    ST-050 CORNING 500/pk 196 EUR

    .5ML CONICAL BOTTOM AMBER SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS

    ST-050-X CORNING 500/pk 222 EUR

    1.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS. CLEAR

    ST-150 CORNING 500/pk 196 EUR

    1.5ML STERILE CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS

    ST-150-C-S CORNING 500/pk 280 EUR

    1.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAP. AMBER

    ST-150-X CORNING 500/pk 221 EUR

    2.0ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS. CLEAR

    ST-200 CORNING 500/pk 196 EUR

    2.0ML STERILE CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS

    ST-200-C-S CORNING 500/pk 280 EUR

    2.0ML AMBER CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS

    ST-200-X CORNING 500/pk 221 EUR

    Block, 15 x 1.5ml or 2.0ml centrifuge tubes (conical)

    BCM1405-B1520 Bio Basic 1 pcs, 1 UNIT 162.3 EUR

    Conical Centrifuge Tube, PP/HDPE, 50ml, RCF 14000Xg, 500/case

    SP61161 Bio Basic 1CS, 500UNIT 175.63 EUR

    COOLRACK M15-PF, GRAY, HOLDS 15 X 1.5ML MICROFUGE TUBES, TAPERED WELLS FOR CONICAL TUBES

    432047 CORNING 1/pk 238 EUR

    COOLRACK M30-PF, GRAY, HOLDS 30 X 1.5ML MICROFUGE TUBES, TAPERED WELLS FOR CONICAL TUBES

    432048 CORNING 1/pk 344 EUR

    ADAPTERS FOR 10/15ML TUBES IN 50ML ROTOR,6/CS

    480140 CORNING 6/pk 120 EUR

    ADAPTERS FOR 5/7ML TUBES IN 50ML ROTOR,6/CS

    480141 CORNING 6/pk 120 EUR

    FILTER TOP TUBES,,50ML,50MM,.45UM,CA,S,IND1/12

    430314 CORNING 1/pk 95 EUR

    COOLRACK 500UL M30-PF, GRAY, HOLDS 30 X 500UL MICROFUGE TUBES, TAPERED WELLS FOR CONICAL TUBES

    432046 CORNING 1/pk 344 EUR

    0.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS (SELF STANDING). CLEAR

    ST-050-SS CORNING 500/pk 196 EUR

    0.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS (SELF STANDING). AMBER

    ST-050-SS-X CORNING 500/pk 222 EUR

    1.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS (SELF STANDING) CLEAR

    ST-150-SS CORNING 500/pk 196 EUR

    1.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS (SELF STANDING) AMBER

    ST-150-SS-X CORNING 500/pk 221 EUR

    2.0ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS. CLEAR. SELF STANDING

    ST-200-SS CORNING 500/pk 196 EUR

    2.0ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES WITHOUT CAPS. AMBER. SELF STANDING

    ST-200-SS-X CORNING 500/pk 221 EUR

    FALCON® CUSHIONS (FOR 175ML AND 225ML CONICAL CENTRIFUGE TUBES WITH EXTRACTOR)

    352090 CORNING 8/pk 86 EUR

    Optional generator, 10mm x 115mm saw tooth, for 15ml and 50ml tubes

    BCM1235 Bio Basic 1 pcs, 1 UNIT 430.98 EUR

    T4 DNA Ligase - 400 units/µl - 100,000 units

    3212 Intact Genomics 1/EA 222 EUR

    T4 DNA Ligase - 2000 units/µl - 100,000 units

    3216 Intact Genomics 1/EA 222 EUR

    T4 DNA Ligase - 2000 units/µl - 400,000 units

    3217 Intact Genomics 1/EA 361 EUR

    FALCON® 50ML HIGH CLARITY PP CENTRIFUGE TUBE, CONICAL BOTTOM, STERILE, 25/BAG, 500/CASE

    352070 CORNING 25/pk 108 EUR

    FALCON® 50ML HIGH CLARITY PP CENTRIFUGE TUBE, CONICAL BOTTOM, STERILE, 25/RACK, 500/CASE

    352098 CORNING 25/pk 119 EUR

    GBT-440

    B3031-25 Biovision 25 mg 591 EUR

    GBT-440

    B3031-5 Biovision 5 mg 186 EUR

    1.5ML CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES AND ATTACHED CLEAR LOOPED CAPS WITH "O" RINGS

    SCT-150-LP-C CORNING 500/pk 584 EUR

    CYLINDER,GRAD,50ML,PLASTIC,SINGLE METRIC SCALE,PP,TC W/FUNNEL TOP,1/12

    3022P-50 CORNING 1/pk 134 EUR

    5-Well Centrifuge Tube Box (1.5ml To 2ml Tubes)

    R005-G Bio Basic 1 UNIT 51.31 EUR

    Cryo storage box, polycarbonate, for 25 (5x5) 5mL tubes

    C2581 MTC Bio 5/pack 96.58 EUR

    Optional generator 14mm x 130mm saw tooth, for 50ml tubes up to 250ml vessels

    BCM1236 Bio Basic 1 pcs, 1 UNIT 1172.95 EUR

    50ML 2-Mercaptoethanol

    NAT1070 National Diagnostics 50ML 94 EUR

    TubeSpin Bioteactor (50mL)

    TS50 Next Advance 180case 65 EUR

    CRYOPRESERVATION BAG, 50ML

    91-200-88 CORNING 1/pk 81 EUR

    Burettes Brush, 50ml

    BR004-50 Bio Basic 1 UNIT 51.74 EUR

    Background Buster, 50ml

    NB306-50 Innovex 50 ml 396 EUR

    2.0ML STERILE, CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES AND ATTACHED ASSORTED COLOR CAPS WITH "O" RINGS

    SCT-200-A-S CORNING 500/pk 887 EUR

    TC Gel

    CP048-005 GenDepot 500 g 232 EUR

    TC Gel

    CP048-010 GenDepot 1 Kg 347 EUR

    TC 1

    B7148-10 ApexBio 10 mg 389 EUR

    TC 1

    B7148-50 ApexBio 50 mg 1476 EUR

    TC 14012

    B7639-1 ApexBio 1 mg 187 EUR

    TC 14012

    B7639-10 ApexBio 10 mg 1152 EUR

    TC 14012

    B7639-5 ApexBio 5 mg 670 EUR

    T5 Exonuclease - 5,000 units

    3374 Intact Genomics 1/EA 274 EUR

    Microfuge Tubes

    D107 Cygnus Technologies 1 bag (50 tubes) 175 EUR

    CSF Tubes

    213361-(V100) ImmunoStep 100 tubes 1688 EUR

    CSF Tubes

    213361-(V25) ImmunoStep 25 tubes 505 EUR

    CSF Tubes

    213361-(V6) ImmunoStep 6 tubes 186.5 EUR

    CSF Tubes

    abx290032-100tubes Abbexa 100 tubes 1957 EUR

    CSF Tubes

    abx290032-25tubes Abbexa 25 tubes 662 EUR

    CSF Tubes

    abx290032-6tubes Abbexa 6 tubes 314 EUR

    Tissue Grinding Pestles, Conical

    GR111 Bio Basic 1 UNIT 55.66 EUR

    2.0ml conical bottom sterile

    D1031-ST25 Benchmark Scientific 1 PC 202.46 EUR

    50ML Protein Precipitation Kit

    NAT1254 National Diagnostics 50ML 225 EUR

    Graduated Plastic Beakers, 50ml

    BK044-2 Bio Basic 1 UNIT 52.18 EUR

    CORNING, SYRINGE TIPS, 50ML

    6627 CORNING 1/pk 58 EUR

    1.5ML STERILE, CONICAL BOTTOM SCREW CAP TUBES AND ATTACHED CLEAR CAPS WITH "O" RINGS.(SELF STANDING) CLEAR

    ST-150-SS-C-S CORNING 500/pk 280 EUR

    Taq DNA Ligase - 10,000 units

    3219 Intact Genomics 1/EA 253 EUR

    T4 DNA Polymerase - 500 units

    3222 Intact Genomics 1/EA 206 EUR

    Taq DNA Polymerase - 5,000 units

    3245 Intact Genomics 1/EA 517 EUR

    igScript Reverse Transcriptase - 50,000 units

    3344 Intact Genomics 1/EA 300 EUR

    T7 Endonuclease I - 1,250 units

    3612 Intact Genomics 1/EA 257 EUR

    T4 DNA Ligase, 1 units/㎕

    T2622-020 GenDepot 200units 142 EUR

    T4 DNA Ligase, 1 units/㎕

    T2622-100 GenDepot 5X200units 504 EUR

    TC-DAPK 6

    HY-15513 MedChemExpress 50mg 475 EUR

    TC-MCH 7c

    HY-107623 MedChemExpress 10mM/1mL 654 EUR

    TC-S 7005

    HY-108597 MedChemExpress 5mg 463 EUR

    TC-Mps1-12

    HY-110115 MedChemExpress 1mg 250 EUR
    W pierwszym przypadku, oprócz głęboko ciężkiego fenotypu twarzoczaszki, heterozygotyczne myszy pochodzące z CBA wykazywały również opóźnione kostnienie kości długich, zespolenia żeber i anomalie palców. Wyniki naszych badań wskazują, że czynniki o różnym podłożu genetycznym w dużym stopniu przyczyniają się do fenotypu Tcof1.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *