-
- Opracowano metodologię w celu zakotwiczenia rybosomów Escherichia coli 70S na chemicznie zmodyfikowanej powierzchni szkła reagującej z cysteiną. Unieruchomione rybosomy zachowują zdolność wiązania szablonu kwasu poliurydylowego (poli(U)) umożliwiając badanie właściwości mechanicznych poszczególnych kompleksów rybosom-poli(U) za pomocą pęsety laserowej. Streptawidyna – powlekane mikrosfery polistyrenowe związane specyficznie z biotynylowanym końcem 3′ długich (do 10 000 zasad) nici poli(U).
- Zbudowano nowatorską metodę optyczną do kontrolowania położenia pułapki laserowej wzdłuż osi optycznej mikroskopu z rozdzielczością 2 nm, ułatwiając pomiar zależności siła-wydłużenie dla poli(U). Niektóre unieruchomione kompleksy rybosom-poli(U) wspierały siłę 100 pN przyłożoną na końcu 3′ mRNA. Wiązanie N-acetylowanego Phe-tRNA(Phe), analogu inicjatora fMet-tRNA(Met), wzmocniło populację kompleksów, które mogły wytrzymać duże siły. Stwierdzono, że długość trwałości homopolimeru poli(U) RNA, modelowanego jako łańcuch robakopodobny, wynosiła 0,79 +/- 0,05 nm, a elastyczność szkieletu wynosiła 900 +/- 140 pN, podobnie jak wartości dla jednoniciowego DNA.
Ukierunkowany ultradźwiękowy środek kontrastowy do obrazowania molekularnego stanu zapalnego w przepływie z dużym ścinaniem.
- Ukierunkowane ultradźwiękowe materiały kontrastowe (mikropęcherzyki wypełnione gazem przenoszące ligandy selektyn lub integryn śródbłonka) zostały zbadane jako potencjalne środki do obrazowania molekularnego. Takie mikropęcherzyki zwykle wykazują dobrą zdolność celowania w warunkach wolniejszego przepływu.
- Jednak w warunkach intensywnego przepływu wiązanie może być ograniczone. W tym miejscu opisujemy mikrobanieczkę zdolną do wydajnego wiązania się z celami zarówno w powolnym, jak i szybkim przepływie (przekraczającym naprężenie ścinające ściany 4 dyne/cm2) przy użyciu klastrowej postaci polimerycznej szybko wiążącego ligandu selektyny, sialilu Lewis(X).
- Mikropęcherzyki przygotowano z dekafluorobutanu i stabilizowano monowarstwą fosfatydylocholiny, stearynianu PEG i biotyna-PEG-lipid. Biotynylowany PSLe(x) (sialilo-Lewis(X) poliakrylamid) lub biotynylowane przeciwciało przeciw selektynie P (RB40.34) przyłączono do mikropęcherzyków przez mostek streptawidynowy .
- W modelu ukierunkowanej adhezji z równoległymi płytkami w komorze przepływowej, pęcherzyki PSLe(x) wykazywały specyficzną adhezję, retencję i powolne toczenie na płytkach pokrytych P-selektyną.
- Wydajność trwałej celowanej adhezji do powierzchni selektyny P (140 cząsteczek/mikrom(2)) była porównywalna dla pęcherzyków przenoszących przeciwciała i ukierunkowanych na PSLe(x) pęcherzyków przy naprężeniu ścinającym 0,68 dyny/cm(2). Przy szybkim przepływie (4,45 dyny/cm(2)), nakierowane na PSLe(x) pęcherzyki zachowały swoją zdolność do wiązania, podczas gdy celowanie za pośrednictwem przeciwciał spadło ponad 20-krotnie. Przy niższej gęstości powierzchniowej selektyny P (7 cząsteczek/mikrom(2)), ukierunkowanie przez PSLe(x) było skuteczniejsze niż przez przeciwciało we wszystkich testowanych warunkach przepływu.
- Płytki z kontrolą ujemną pokryte kazeiną nie zatrzymywały pęcherzyków w badanym zakresie warunków przepływu. Aby potwierdzić echogeniczność, ukierunkowane pęcherzyki PSLe(x) uwidoczniono na płytkach polistyrenowych pokrytych selektyną P za pomocą obrazowania ultrasonograficznego za pomocą skanera klinicznego działającego w trybie inwersji impulsów; płytki kontrolne pozbawione ukierunkowanych pęcherzyków nie wykazywały znaczącego akustycznego rozpraszania wstecznego.
- In vivo, w mysim modelu zapalenia w żyle udowej, skuteczność celowania dożylnie podawanych mikropęcherzyków PSLe(x) była porównywalna z celowaniem za pośrednictwem przeciwciała przeciwko selektynie P i znacznie przewyższała akumulację nieukierunkowanych pęcherzyków kontrolnych . W stanie zapalnym tętnicy udowej, celowanie mikropęcherzykowe za pośrednictwem PSLe(x) było lepsze niż celowanie za pośrednictwem przeciwciał.
Test transglutaminazy na płytce do mikromiareczkowania wykorzystujący 5-(biotynamido)pentyloaminę jako substrat.
- Transglutaminazy należą do ważnej rodziny enzymów zaangażowanych w hemostazę, tworzenie skóry i gojenie ran. Opisujemy technikę pomiaru aktywności transglutaminazy przy użyciu polistyrenowych płytek do mikromiareczkowania pokrytych N,N’-dimetylokazeiną.
- Substrat 5-(biotynamido)pentyloamina jest kowalencyjnie włączany do N,N’-dimetylokazeiny przez transglutaminazę w reakcji zależnej od wapnia.
- Biotynylowany produkt wykrywa się za pomocą streptawidyny -fosfatazy alkalicznej i oznacza ilościowo mierząc absorbancję przy 405 nm po dodaniu fosforanu p-nitrofenylu.
- Test jest czuły, specyficzny i liniowy przy stężeniach czynnika XIIIa w osoczu pomiędzy 0,08 i 1,25 mikrograma/ml oraz przy stężeniach oczyszczonej transglutaminazy z wątroby świnki morskiej pomiędzy 0,05 i 0,8 mikrograma/ml.
- Współczynnik zmienności wewnątrztestowej wynosi mniej niż 8%. Test fazy stałej zastosowano do ilościowego określenia aktywności transglutaminazy w ekstraktach Escherichia coli wyrażających rekombinowane łańcuchy A czynnika XIII oraz do analizy inhibitorów czynnika XIIIa.
- Metoda ta ułatwi analizę zależności struktura-funkcja transglutaminaz przy użyciu metod rekombinacji DNA. Ponadto, badanie przesiewowe naturalnych i syntetycznych inhibitorów czynnika XIIIa będzie przyspieszone za pomocą tego testu na płytce do mikromiareczkowania w fazie stałej.
Identyfikacja białka szoku cieplnego 60 jako liganda na Histoplasma capsulatum, który pośredniczy w wiązaniu się z receptorami CD18 na ludzkich makrofagach.
- Histoplasma capsulatum (Hc) jest fakultatywnym wewnątrzkomórkowym grzybem, który wiąże się z receptorami CD11/CD18 na makrofagach (Mphi). Aby zidentyfikować ligand(y) na drożdżach Hc, który jest rozpoznawany przez Mphi, oczyszczony ludzki receptor dopełniacza typu 3 (CR3, CD11b/CD18) zastosowano do sondowania Far Western blot ekstraktu detergentowego ściany komórkowej i błony komórkowej Hc.
- CR3 rozpoznał pojedyncze białko 60 kDa, które zostało zidentyfikowane jako białko szoku cieplnego 60 (hsp60). Biotynylacja żywotnych drożdży, a następnie precypitacja za pomocą kulek pokrytych streptawidyną i Western blotting z anty-hsp60 wykazały, że hsp60 znajdowało się na powierzchni drożdży Hc.
- Mikroskopia elektronowa i konfokalna ujawniła, że hsp60 znajduje się na ścianie komórkowej drożdży w oddzielnych skupiskach. Rekombinowany hsp60 (rhsp60) hamował przyłączanie się drożdży Hc do Mphi.
- Rekombinowane hsp60 i Abs do CD11b i CD18 hamowały wiązanie drożdży z komórkami jajnika chomika chińskiego transfekowanymi CR3 (CHO3). Kulki polistyrenowe pokryte rhsp60 wiązały się z Mphi, a przyłączanie było hamowane przez Abs do CD11 i CD18.
- Ekstrakt z zamrażania/rozmrażania (F/TE), preparat białek powierzchniowych drożdży Hc, który zawierał hsp60, hamował przyłączanie drożdży Hc do Mphi. Zubożenie hsp60 z F/TE usunęło zdolność F/TE do blokowania wiązania Hc do Mphi.
- Co ciekawe, rhsp60 nie hamowało wiązania drożdży Hc z komórkami dendrytycznymi (DC), które rozpoznają Hc przez bardzo późne Ag5. Ponadto F/TE hamował przyłączanie Hc do DC, nawet po wyczerpaniu hsp60. Zatem Hc hsp60 wydaje się być głównym ligandem, który pośredniczy w przyłączaniu Hc do Mphi CD11/CD18, podczas gdy DC rozpoznają Hc przez inny ligand(y).
Szybkie wykrywanie wirusa opryszczki pospolitej w próbkach klinicznych za pomocą wychwytującego testu immunoabsorpcji enzymatycznej biotyna- streptawidyna .
- Opracowano czuły enzymatyczny test wychwytywania immunosorbentu z biotyną i streptawidyną (wychwytywanie B/SA ELISA) do wykrywania antygenu wirusa opryszczki pospolitej (HSV). Królicze przeciwciało anty-HSV (frakcja immunoglobuliny G) opłaszczono na płaskodennych, napromieniowanych, 96-studzienkowych polistyrenowych płytkach do mikromiareczkowania i służyło do wychwytywania antygenu HSV.
- Dodano próbki kliniczne od pacjentów z opryszczką narządów płciowych. Jako drugie przeciwciało zastosowano króliczą immunoglobulinę G anty-HSV związaną z biotyną. Kompleks antygen-przeciwciało wykryto za pomocą streptawidyny sprzężonej z fosfatazą alkaliczną , która połączyła się z biotyną.
- W przypadku próbek klinicznych test miał czułość 95,6% i swoistość 91,4% w porównaniu z metodą hodowli tkankowej. Obecność antygenu HSV w próbkach pozbawionych zakaźności potwierdzono blokując reakcję nieznakowanym króliczym i ludzkim przeciwciałem przeciwko HSV.
- Poziom antygenu wykryty w teście ELISA wychwytywania B/SA niekoniecznie korelował z mianem zakaźności próbek.
- Antygeny HSV można było wykryć w teście ELISA wychwytywania B/SA, gdy zakaźność wirusa została zniszczona w temperaturze 37 stopni C, przez napromieniowanie UV lub przez traktowanie Tritonem X-100, ale nie przy traktowaniu podchlorynem
Streptavidin Coated Polystyrene Particles
SVP-05-100 Spherotech 100 mL 2203.2 EUR Streptavidin Coated Polystyrene Particles
SVP-2000-4 Spherotech 4 mL 559.2 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 1 µm
DNM-M011 Creative Diagnostics 1 mL 763.2 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 0.3-0.4 µm
DNM-C005 Creative Diagnostics 10 mL 811.2 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 0.4-0.6 µm
DNM-C006 Creative Diagnostics 10 mL 987.6 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 0.7-0.9 µm
DNM-C007 Creative Diagnostics 10 mL 795.6 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 1.5-1.9 µm
DNM-C008 Creative Diagnostics 5 mL 987.6 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 3.0-3.9 µm
DNM-C009 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 4.0-4.9 µm
DNM-C010 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 5.0-5.9 µm
DNM-C011 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 6.0-8.0 µm
DNM-C012 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 8.0-12.9 µm
DNM-C013 Creative Diagnostics 4 mL 1200 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 13.0-17.9 µm
DNM-C014 Creative Diagnostics 4 mL 1294.8 EUR DiagPoly Streptavidin Coated Polystyrene Particles, 18.0-24.0 µm
DNM-C015 Creative Diagnostics 4 mL 1310.4 EUR Streptavidin Polystyrene
SVP-1000-4 Spherotech 4 mL 566.4 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-03-10 Spherotech 10 mL 327.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-05-10 Spherotech 10 mL 327.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-08-10 Spherotech 10 mL 327.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-10-100 Spherotech 100 mL 3981.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-10-5 Spherotech 5 mL 339.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-100-4 Spherotech 4 mL 474 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-15-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-15-50 Spherotech 50 mL 2064 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-150-4 Spherotech 4 mL 493.2 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-20-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-200-4 Spherotech 4 mL 517.2 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-30-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-30-50 Spherotech 50 mL 2064 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-40-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-400-4 Spherotech 4 mL 590.4 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-50-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-60-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-60-50 Spherotech 50 mL 2064 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-800-05 Spherotech 5 mL 164.4 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP-800-4 Spherotech 4 mL 566.4 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP01-008-5 Spherotech 5 mL 511.2 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP1-200-4 Spherotech 4 mL 790.8 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP1-30-5 Spherotech 5 mL 578.4 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVP1-50-5 Spherotech 5 mL 578.4 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVPX-08-10 Spherotech 10 mL 327.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVBP-02-10 Spherotech 10 mL 315.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVBP-02-100 Spherotech 100 mL 1850.4 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVBP-03-10 Spherotech 10 mL 315.6 EUR Streptavidin Polystyrene Particles
SVBP-03-100 Spherotech 100 mL 1850.4 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Particles, 25 µm
DNG-P078 Creative Diagnostics 1 mL 951.6 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Particles, 30 µm
DNG-P079 Creative Diagnostics 1 mL 963.6 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Particles, 40 µm
DNG-P080 Creative Diagnostics 1 mL 963.6 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Particles, 50 µm
DNG-P081 Creative Diagnostics 1 mL 963.6 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Particles, 100 µm
DNG-P082 Creative Diagnostics 1 mL 963.6 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Particles, 12 µm
DNG-P225 Creative Diagnostics 1 mL 920.4 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Nanoparticles, 100 nm
DNG-P076 Creative Diagnostics 1 mL 951.6 EUR DiagPoly Streptavidin Polystyrene Nanoparticles, 200 nm
DNG-P077 Creative Diagnostics 1 mL 951.6 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Polystyrene Particles, 12 µm
WHM-G159 Creative Diagnostics 1 mL 664.8 EUR DiagPoly Streptavidin Fluorescent Polystyrene Particles, Yellow Green, 1 µm
DNG-P218 Creative Diagnostics 1 mL 1170 EUR Streptavidin coated 96-well Plate
6523-5 Biovision each 392.4 EUR BSA Coated Polystyrene Particles
BP-08-10 Spherotech 10 mL 291.6 EUR BSA Coated Polystyrene Particles
BP-30-5 Spherotech 5 mL 322.8 EUR BSA Coated Polystyrene Particles
BP-60-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR BSA Coated Polystyrene Particles
BP2-150-5 Spherotech 5 mL 608.4 EUR Ms IgG Coated Polystyrene Particles
MsGPX-50-5 Spherotech 5 mL 376.8 EUR Oligo (dT)25 Coated Polystyrene Beads
OdT25P-100-4 Spherotech 4 mL 493.2 EUR Anti-DNP Coated Polystyrene Particles
DNPP-50-2 Spherotech 2 mL 346.8 EUR Anti-Digoxigenin Coated Polystyrene Particles
DIGP-05-2 Spherotech 2 mL 334.8 EUR Anti-Digoxigenin Coated Polystyrene Particles
DIGP-20-2 Spherotech 2 mL 346.8 EUR Anti-Digoxigenin Coated Polystyrene Particles
DIGP-40-2 Spherotech 2 mL 346.8 EUR Ms Anti-FLAG M2 Coated Polystyrene Particles
MPAF-05-2 Spherotech 2 mL 372 EUR Ms Anti-FLAG M2 Coated Polystyrene Particles
MPAF-20-2 Spherotech 2 mL 352.8 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Dextran Coated, 130 nm
WHM-G019 Creative Diagnostics 1 mL 664.8 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Dextran Coated, 250 nm
WHM-G034 Creative Diagnostics 1 mL 661.2 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Dextran Coated, 500 nm
WHM-G047 Creative Diagnostics 1 mL 686.4 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Dextran Coated, 100 nm
WHM-G121 Creative Diagnostics 1 mL 770.4 EUR Goat anti-Rat IgG (Fc) Coated Polystyrene Particles
RTPFC-60-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 0.7-0.9 µm
DNM-C001 Creative Diagnostics 10 mL 1212 EUR DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 1.0-1.4 µm
DNM-C002 Creative Diagnostics 10 mL 1212 EUR DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 3.0-3.9 µm
DNM-C003 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 6.0-8.0 µm
DNM-C004 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR DiagPoly Biotin Coated Polystyrene Particles, 0.7-0.9 µm
DNM-C016 Creative Diagnostics 10 mL 1062 EUR DiagPoly Biotin Coated Polystyrene Particles, 3.0-3.9 µm
DNM-C017 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR DiagPoly Biotin Coated Polystyrene Particles, 6.0-8.6 µm
DNM-C018 Creative Diagnostics 5 mL 1200 EUR Goat anti-Rat IgG (H&L) Coated Polystyrene Particles
RTPXA-60-5 Spherotech 5 mL 339.6 EUR Streptavidin coated ELISA plates (8 wells strip, 96 wells/plates) 5 plates/pk
SVDN55-5P Alpha Diagnostics 1 PK 315.6 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Dextran Coated, 50 nm
WHM-G087 Creative Diagnostics 1 mL 895.2 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Dextran Coated, 80 nm
WHM-G107 Creative Diagnostics 1 mL 895.2 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Cross-linked Dextran Coated, 300 nm
WHM-G090 Creative Diagnostics 1 mL 686.4 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Nanoparticles, Cross-linked Dextran Coated, 500 nm
WHM-G094 Creative Diagnostics 1 mL 728.4 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Pink, 0.4-0.6 µm
DNM-L091 Creative Diagnostics 5 mL 795.6 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Pink, 1.7-2.2 µm
DNM-L092 Creative Diagnostics 5 mL 920.4 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, FITC, 1.7-2.2 µm
DNM-L097 Creative Diagnostics 5 mL 920.4 EUR DiagPoly Biotin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Pink, 0.4-0.6 µm
DNM-L100 Creative Diagnostics 5 mL 795.6 EUR DiagPoly Biotin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Pink, 1.7-2.2 µm
DNM-L101 Creative Diagnostics 5 mL 920.4 EUR DiagPoly Biotin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Pink, 5.0-5.9 µm
DNM-L102 Creative Diagnostics 5 mL 920.4 EUR DiagPoly Biotin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Blue, 3.0-3.9 µm
DNM-L105 Creative Diagnostics 5 mL 920.4 EUR DiagPoly Biotin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Blue, 7.0-7.9 µm
DNM-L106 Creative Diagnostics 5 mL 994.8 EUR Absolute Mag Streptavidin Magnetic Dextran Nanoparticles, Dextran Coated, Fluorescent Red, 300 nm
WHM-G258 Creative Diagnostics 1 mL 1070.4 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Yellow, 0.4-0.6 µm
DNM-L088 Creative Diagnostics 5 mL 795.6 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Yellow, 0.7-0.9 µm
DNM-L089 Creative Diagnostics 5 mL 795.6 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Yellow, 1.7-2.2 µm
DNM-L090 Creative Diagnostics 5 mL 920.4 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Purple, 0.4-0.6 µm
DNM-L093 Creative Diagnostics 5 mL 795.6 EUR DiagPoly Avidin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Purple, 0.7-0.9 µm
DNM-L094 Creative Diagnostics 5 mL 795.6 EUR DiagPoly Biotin Coated Fluorescent Polystyrene Particles, Yellow, 0.4-0.6 µm
DNM-L098 Creative Diagnostics 5 mL 795.6 EUR Większą czułość uzyskano, gdy w każdym teście stosowano jednocześnie odczynniki z przeciwciałami specyficznymi dla HSV-1 i HSV-2. Wychwytywanie B/SA ELISA zapewnia stosunkowo szybką metodę (4,5 godziny), która jest dość czuła i specyficzna w porównaniu z innymi metodami bezpośredniego oznaczenia bez hodowli tkankowej